理想的脑血管痉挛(cerebral vasospasm, CVS)动物模型应符合以下条件:①动物出现CVS的症状与人类的CVS症状相似;②制作简单,费用低;③所用动物脑血管变异较少;④可以控制CVS的程度;⑤可用此模型进行慢性实验;⑥在一定的部位有较高的脑缺血发生率;⑦有类似动脉瘤破裂时动脉壁的损伤;⑧有急性颅内压增高的表现;⑨在蛛网膜下腔中有足够量的血凝块。目前最常用动物模型为采用双次注血法制作的模型,具有可复制性、同人痉挛时间一致、成功率高等优点。但是其忽略了下述因素:(1)SAH急性期颅内压急剧升高。由于动脉损伤,脑组织直接暴露于动脉血压之中,此时收缩压可高达正常颅内压的30~50倍,脑组织受到血流的直接冲击;(2)由于血管壁的直接损伤,在SAH病理生理中起重要作用的血管生物活性物质的释放。血管内穿刺模型较好的解决了上述问题,并能基本符合理想动物模型的条件。采用血管内穿刺法制作兔脑血管痉挛模型未见相关文献报道,本文旨在探讨该模型的制作方法。
1 材料与方法
1.1 实验动物和分组
健康清洁级新西兰大白兔由苏州大学医学院实验动物中心提供,体重2.5~3.5kg,4~5月龄。随机分为12小时、1天、2天、3天、7天五大组,每组7只,其中每组又分为SAH组(每组5只)及对照组(导丝进入颈内动脉(internal carotid artery, ICA),但未刺破ICA。每组2只),出现死亡则给予补充。
1.2 动物模型的制备
血管内穿刺法制作兔SAH模型。实验兔采用30%乌来糖(2.0~3.0ml/kg)溶液静脉注射麻醉成功后。将兔仰卧固定于自制手术台,并摆正头颅位置。安尔碘消毒后铺无菌单。在右腹股沟钝性分离出兔股动脉。在动脉上剪一小口,引入0.035in超滑导丝和4FH1导管,透视下进入右(左)颈总动脉中上段,退出导丝接上Y阀,含肝素生理盐水加压冲洗,压力为250mmHg。常规行右颈总动脉造影,了解颈内动脉起始段血管走行。随后引入塑形的EXCEL-14微导管和Transend微导丝,在Roadmap状态下导管进入ICA后,退出微导丝。然后换用Transend微导丝硬头经微导管进入ICA,此过程中应在透视下密切观察导管形态改变,并作适当调整,以确保导管不会滑出ICA。当导丝硬头进入到ICA后,快速的将导丝推出导管约1cm,重复1~2次后,退出导丝。经导管再次造影,了解刺破后血管的即刻改变。最后撤离导管,右股动脉结扎,皮肤缝合。
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